محسن ساسانی؛ مسعود احمدزاده
چکیده
گندم یکی از مهمترین محصولات کشاورزی در ایران است که نقش مهمی درتامین امنیت غذایی کشور دارد، بیماری پوسیدگی طوقه و ریشه گندم با عامل F. pseudograminearum ، از مهمترین بیمارگرهای گندم است که هر ساله موجب ایجاد خسارت‌های اقتصادی میشود، در این مطالعه 80 جدایه باکتری جنس باسیلوس از ریزوسفر مزارع گندم شهرستان‌های استان همدان؛ جداسازی شد، در آزمون ...
بیشتر
گندم یکی از مهمترین محصولات کشاورزی در ایران است که نقش مهمی درتامین امنیت غذایی کشور دارد، بیماری پوسیدگی طوقه و ریشه گندم با عامل F. pseudograminearum ، از مهمترین بیمارگرهای گندم است که هر ساله موجب ایجاد خسارت‌های اقتصادی میشود، در این مطالعه 80 جدایه باکتری جنس باسیلوس از ریزوسفر مزارع گندم شهرستان‌های استان همدان؛ جداسازی شد، در آزمون کشت متقابل به ترتیب جدایه‌های UTB 3 و UTB 11 و UTB 22 و UTB 4 و UTB 7 با 60، 55، 37.5، 22.5 و 20 درصد بیشترین توانایی را در ممانعت از رشد قارچ F. pseudograminearum نشان دادند، در آزمون تاثیر متابولیت‌های فرّار نیز UTB 3 و UTB 7 و UTB 11 به‌ترتیب با 54، 52 و 49 درصد بیشترین درصد بازداری از رشد قارچ را نشان دادند. این جدایه‌ها همچنین توانایی تثبیت نیتروژن، تولید سیدروفور و آنزیم‌های خارج سلولی موثر در کنترل بیولوژیک (پروتئاز، لیپاز و کیتیناز) را داشتند، اما هیچکدام از جدایه‌ها قادر به تولیدآنزیم فسفاتاز نبودند. بررسی‌های گلخانه‌ای که به‌صورت تیمار بذور گندم با جدایه-های برتر انجام شد نشان داد که جدایه UTB 3 توانست بیماری پوسیدگی طوقه و ریشه گندم را به میزان 80.33 درصد در مقایسه با تیمار شاهد کنترل کند، همچنین این جدایه توانست موجب افزایش شاخص‌های رشدی گندم (طول ساقه و وزن خشک ریشه)، در حضور و عدم حضور قارچ بیمارگر گردد. لذا این جدایه به عنوان جدایه برتر جهت کنترل بیماری پوسیدگی طوقه و ریشه و افزایش شاخص‌های رشدی گندم معرفی می‌گردد.
کنترل بیولوژیک بیمایهای گیاهی
فاطمه سادات سیدین؛ مسعود احمدزاده؛ رضا طلایی حسنلویی؛ مجید اولیاء؛ هلگه بی بوده
چکیده
Biocontrol of plant parasitic nematodes to decrease the chemical pesticides effects is one of the top priorities. Entomopathogenic bacteria, Xenorhabdus spp. and Photorhabdus spp., are important due to production of natural products with antibacterial and antifungal activity. The effect of the cell-free culture filtrates (CFF) of symbiotic bacteria species Xenorhabdus nematophila, X. bovienii and Photorhabdus luminescens isolated from entomopathogenic nematodes Steinernema carpocapsae, S. feltiae and Heterorhabditis bacteriophora on the egg hatching and mortality of the second stage juveniles of ...
بیشتر
Biocontrol of plant parasitic nematodes to decrease the chemical pesticides effects is one of the top priorities. Entomopathogenic bacteria, Xenorhabdus spp. and Photorhabdus spp., are important due to production of natural products with antibacterial and antifungal activity. The effect of the cell-free culture filtrates (CFF) of symbiotic bacteria species Xenorhabdus nematophila, X. bovienii and Photorhabdus luminescens isolated from entomopathogenic nematodes Steinernema carpocapsae, S. feltiae and Heterorhabditis bacteriophora on the egg hatching and mortality of the second stage juveniles of root-knot nematode Meloidogyne javanica was determined. Exposure of eggs of M. javanica to CF resulted in the reduced hatching of nematode eggs with higher recorded effect for X. nematophila CF. Analysis of mortality data for juveniles at 24, 48 and 72 h following exposure to CFFs indicated that X. nematophila and P. luminescens were more toxic than X. bovienii after 24 h. However, X. bovienii was more toxic in lower concentration after 48 and 72h post-exposure. Thus, these bacteria have a potential as biocontrol agents for the management of root-knot nematode.
فرشته حیدری تاج آبادی؛ مسعود احمدزاده؛ غلامرضا صالحی جوزانی؛ پژمان خدایگان
چکیده
باکتری گرم منفی Bdellovibrio bacteriovorus یک باکتری شکارگر است که دیگر باکتریهای گرم منفی را از ناحیه پریپلاسم، مورد حمله قرار داده و باعث متلاشی شدن باکتری میزبان میشود، لذا این باکتری پتانسیل استفاده به عنوان شکارگر عوامل بیمارگر گیاهی را دارا است. هدف از اجرای تحقیق حاضر، جداسازی، شناسایی و بررسی خصوصیات باکتریهای Bdellovibrio از نمونه های آب ...
بیشتر
باکتری گرم منفی Bdellovibrio bacteriovorus یک باکتری شکارگر است که دیگر باکتریهای گرم منفی را از ناحیه پریپلاسم، مورد حمله قرار داده و باعث متلاشی شدن باکتری میزبان میشود، لذا این باکتری پتانسیل استفاده به عنوان شکارگر عوامل بیمارگر گیاهی را دارا است. هدف از اجرای تحقیق حاضر، جداسازی، شناسایی و بررسی خصوصیات باکتریهای Bdellovibrio از نمونه های آب و خاک شهر رفسنجان در استان کرمان برای اولین بار بود. در این راستا، پس از نمونه برداری، دو جدایه باکتری Bdellovibrio با استفاده از باکتری Escherichia coli سویه K12 به عنوان میزبان (شکار) روی محیط کشت آگار دو لایه از نمونه های خاک و آب جداسازی شدند. شناسایی جدایه ها در سطح گونه با روش فنوتیپی و تکثیر و توالی یابی ترادف ژن 16S rDNA انجام شد. نتایج بررسی فیلوژنتیکی نشان داد که جدایه ها به میزان ۹۹ درصد با گونه B. bacteriovorus شباهت دارند. در ادامه اثرات شکارگری این دو جدایه بر روی 9 باکتری گرم منفی مختلف بررسی شد. نتایج نشان داد که جدایه ها فقط قادر به شکارگری باکتری E. coli هستند.
کنترل بیولوژیک بیمایهای گیاهی
حمیده افشارمنش؛ مسعود احمدزاده
چکیده
اعضای جنس باسیلوس به‌عنوان باکتریهای آنتاگونیست امیدبخش برای کنترل زیستی (بیولوژیک) عامل‌های بیماریزای گیاهی شناخته شدهاند. در این تحقیق عصارۀ بدون یاخته‌ای سه سویه Bacillus subtilis UTB96، B. subtilis UTB1 وB. subtilis UTB70 علیه قارچ Aspergillus flavus R5 به روش کشت متقابل بررسی شد که سویۀ B. subtilis UTB96 بیشترین اثر بازدارندگی (05/0p≤) را نشان داد. رنگ‌نگاری ...
بیشتر
اعضای جنس باسیلوس به‌عنوان باکتریهای آنتاگونیست امیدبخش برای کنترل زیستی (بیولوژیک) عامل‌های بیماریزای گیاهی شناخته شدهاند. در این تحقیق عصارۀ بدون یاخته‌ای سه سویه Bacillus subtilis UTB96، B. subtilis UTB1 وB. subtilis UTB70 علیه قارچ Aspergillus flavus R5 به روش کشت متقابل بررسی شد که سویۀ B. subtilis UTB96 بیشترین اثر بازدارندگی (05/0p≤) را نشان داد. رنگ‌نگاری (کروماتوگرافی) لایۀ نازک با لیپوپپتیدهای استخراج‌شده از باکتریها، نشان‌دهندۀ حضور هر سه خانواده از لیپوپپتیدهای ایتورین، فنجایسین و سورفکتین در هر سه سویه است. تجزیه‌وتحلیل بیواتوگرافی کروماتوگرامها علیه قارچ A. flavus R5، نقش بالقوۀ ایتورینها را در فعالیت ضدقارچی سویۀ B. subtilis UTB96 مشخص کرد. به‌منظور تأیید نقش ایتورینها در فعالیت ضدقارچی سویۀ B. subtilis UTB96، ژن bmyB (سومین ژن در مسیر زیست‌ساخت یا بیوسنتز ایتورینها) به کمک جهشزایی هدفمند تخریب شد. بررسی مولکولی شامل تجزیه‌وتحلیل PCR و توالییابی قطعۀ افزایش‌یافته در جهشیافتهها مشخص کرد که ژن مقاومت به آنتی‌بیوتیک اسپکتینومایسین جایگزین ژن هدف (bmyB) شده و به‌این‌ترتیب این ژن تخریب شده است. مقایسۀ فنوتیپی جهشیافتههای bmyB با سویۀ مادری نشان داد که فعالیت ضدقارچی عصارۀ بدون یاخته‌ای و لیپوپپتیدهای استخراج‌شدۀ جهشیافتهها در کشت متقابل باA. flavus ، تجزیه‌وتحلیل اتوبیوگرافی و نیز روی میوۀ پسته کاهش چشمگیری یافته است. بنابراین، یافتههای این پژوهش گویای نقش اصلی لیپوپپتیدهای خانوادۀ ایتورین در کنترل زیستی سویۀ B. subtilis UTB96 علیه A. flavus R5 است.
کنترل بیولوژیک بیمایهای گیاهی
حدیث شهبازی؛ کیوان بهبودی؛ محمد جوان نیکخواه؛ مسعود احمدزاده
چکیده
توانایی کنترل بیولوژیکی سودومونادهای فلورسنت از رقابت بر سر فضا و مواد غذایی، آنتی‌بیوز و کلنیزاسیون ریزوسفر ناشی میشود. در این مطالعه، توانایی بیوکنترلی 39 سویةPseudomonas fluorescens در برابر قارچ Fusarium graminearum عامل بلایت خوشة گندم در شرایط آزمایشگاهی بررسی شد. بازدارندگی از رشد F. graminearum با استفاده از آزمون کشت متقابل، اثر ضد قارچی ...
بیشتر
توانایی کنترل بیولوژیکی سودومونادهای فلورسنت از رقابت بر سر فضا و مواد غذایی، آنتی‌بیوز و کلنیزاسیون ریزوسفر ناشی میشود. در این مطالعه، توانایی بیوکنترلی 39 سویةPseudomonas fluorescens در برابر قارچ Fusarium graminearum عامل بلایت خوشة گندم در شرایط آزمایشگاهی بررسی شد. بازدارندگی از رشد F. graminearum با استفاده از آزمون کشت متقابل، اثر ضد قارچی ترکیبات فرّار و غیرفرّار تولیدشده توسط سویه‌ها ارزیابی شد. در تمام این آزمایش‌ها چهار سویة I P13، UTPf127، UTPf125 وUTPf105 در کنترل بیمارگر موفق‌تر بودند. در نتیجه، این سویه‌ها از نظر وجود ژن‌های hcnAB و phlD و توانایی کلنیزاسیون اکتوریزوسفر گندم در شرایط گلخانه‌ای بررسی شدند. ژن hcnABدر تمام سویه‌ها ردیابی شد؛ در حالی که، ژن phlD در تمام باکتریها به جز P13 مشاهده شد. جمعیت باکتریها در اکتوریزوسفر گندم در سه دورة چهارده روزه توسط سری رقت روی محیط کشت KB+++ تعیین شدند. نتایج این تحقیق نشان داد که تفاوت معنی‌داری میان سویه‌های مختلف در کلنیزاسیون اکتوریزوسفر در روزهای مختلف وجود دارد و با گذشت زمان جمعیت باکتریها در ریزوسفر کاهش می‌یابد. سویه‌های P13 وUTPf125 در روز 42ام قابل ردیابی نبودند، در حالی که، در روز 28ام جمعیت آن‌ها بیش از 104×8/1 سلول در گرم وزن تر ریشه ردیابی شده بود. باکتری UTPf127 با جمعیت 104 × 1/1 سلول در گرم وزن تر ریشه در روز 42ام بیشترین میزان کلنیزاسیون و پایداری در ریزوسفر را نشان داد.
کنترل بیولوژیک بیمایهای گیاهی
وحید فلاح زاده ممقانی؛ مسعود احمدزاده؛ کیوان بهبودی
چکیده
الگوی‌های مولکولی مرتبط با میکروب (Microbe-associated molecular patterns-MAMPs) نقش کلیدی در فعال‌سازی پاسخ‌های ایمنی ذاتی (Innate immunity) در جانوران و به‌صورت مشابهی، به‌عنوان انگیزنده‌های (Elicitors) پاسخ‌های دفاعی در گیاهان دارند. با وجود این، بررسی‌های زیادی دربارة اهمیت واقعی آن‌ها در مقاومت گیاه نسبت به بیمارگرها وجود ندارد. در این تحقیق اثر مشتقات ...
بیشتر
الگوی‌های مولکولی مرتبط با میکروب (Microbe-associated molecular patterns-MAMPs) نقش کلیدی در فعال‌سازی پاسخ‌های ایمنی ذاتی (Innate immunity) در جانوران و به‌صورت مشابهی، به‌عنوان انگیزنده‌های (Elicitors) پاسخ‌های دفاعی در گیاهان دارند. با وجود این، بررسی‌های زیادی دربارة اهمیت واقعی آن‌ها در مقاومت گیاه نسبت به بیمارگرها وجود ندارد. در این تحقیق اثر مشتقات فاکتور نسخه‌برداری Ef-Tu و فلاژلین به‌عنوان MAMPهای شناخته‌شده، در افزایش مقاومت گیاه آرابیدوپسیس نسبت به بیمارگرهای مهم قارچی و باکتریایی بررسی شد. پیش‌تیمار گیاهان Col-0 با هر دوMAMP به‌صورت معنی‌داری مقاومت گیاهان نسبت به قارچ‌های Botrytis cinerea و Alternaria brassicicola را افزایش داد. پیش‌تیمار برگ‌های Col-0 با هر دو MAMP، منحنی رشد باکتری Pseudomonas syringae pv. tomato (Pst DC3000) را به‌صورت معنی‌داری تحت تأثیر قرار داد و باعث کاهش سرعت رشد آن شد. علاوه بر این، جمعیت باکتری Xanthomonas axonopodis pv. citri (Xac306) که به‌عنوان غیربیماریزا روی آرابیدوپسیس مطرح است، در برگ‌های گیاهان وحشی که با MAMPها تیمار نشده بودند، بدون تغییر باقی ماند و 48 ساعت بعد از تلقیح، نه کاهش و نه افزایش نشان داد. هر‌چند پیش‌تیمار برگ‌های این گیاه با elf18 به کاهش جمعیت باکتری منجر شد. نتایج این تحقیق نقش ایمنی ذاتی در افزایش مقاومت گیاه نسبت به بیمارگرها را نشان داد.
کنترل بیولوژیک بیمایهای گیاهی
سمیه السادات قافله باشی؛ فاطمه جمالی؛ مسعود احمدزاده
چکیده
در این تحقیق از باکتری Pseudomonas fluorescens UTPF68، عامل کنترل بیولوژیک، علیه Phytophthora drechsleri استفاده شد. ترکیبات فرّار سویة UTPF68 در سه محیط کشت NA، NAG و PDA به‌ترتیب 44/84 درصد، 55/83 درصد و 33/67 درصد بازدارندگی از رشد میسیلیومی P. drechsleri را در برداشت. نتایج نشان داد که متابولیت‌های خارج‌سلولی تولیدشده توسط سویة UTPF68 در محیط کشت PDA به‌طور کامل از رشد P. drechsleri ...
بیشتر
در این تحقیق از باکتری Pseudomonas fluorescens UTPF68، عامل کنترل بیولوژیک، علیه Phytophthora drechsleri استفاده شد. ترکیبات فرّار سویة UTPF68 در سه محیط کشت NA، NAG و PDA به‌ترتیب 44/84 درصد، 55/83 درصد و 33/67 درصد بازدارندگی از رشد میسیلیومی P. drechsleri را در برداشت. نتایج نشان داد که متابولیت‌های خارج‌سلولی تولیدشده توسط سویة UTPF68 در محیط کشت PDA به‌طور کامل از رشد P. drechsleri ممانعت و در محیط کشت CMA به میزان 3/93 درصد از رشد بیمارگر جلوگیری کرد. سلول و عصارة سویة UTPF68 در سه غلظت 10 درصد، 25 درصد و 50 درصد، درون محیط مایع، به‌طور کامل از رشد P. drechsleriجلوگیری کرد. همچنین، این باکتری توانست هر سه آنتی‌بیوتیک DAPG، MAPG و Plt را در محیط کشت KBG تولید کند. نتایج نشان داد که این باکتری می‌تواند هر دو شرایط in vitro و in vivo را به کنترل P. drechsleri درآورد؛ به‌طوری که، کاربرد غلظت 108 سلول در هر میلی‌لیتر از این باکتری در خاک، خسارت ناشی از این بیمارگر را تا 60 درصد کاهش داد. مایه‌زنی این باکتری با خاک در حضور و نبود بیمارگر باعث بهبود فاکتورهای رشدی گیاه تحت شرایط گلخانه شد. به‌طوری که، از این لحاظ با شاهد سالم تفاوت معنی‌داری نشان داد. بررسی کلونیزاسیون ریشة خیار نشان داد که این باکتری بعد از گذشت دو هفته، توانست منطقة ریزوسفر با جمعیت 109×3/2 در گرم ریشه را کلونیزه کند.
ترویج و توسعه روش های بیوکنترل
سلیمان قاسمی؛ مسعود احمدزاده؛ فرامرز خداییان چگنی
چکیده
هدف از این پژوهش طراحی محیط کشت صنعتی برای به‌دست آوردن حداکثر توده زیستی باکتری Bacillus subtilis UTB96 بود. در اولین گام به‌منظور کاهش هزینه‌های تهیه اجزای محیط کشت، ترکیبات تجاری یا پسماند صنایع مانند ملاس چغندرقند، ملاس نیشکر، فاضلاب سیب‌زمینی و سرم شیر به‌عنوان منابع کربن و شربت ذرت، به‌عنوان منبع ازت بررسی شدند. همچنین، بعضی از ترکیبات ...
بیشتر
هدف از این پژوهش طراحی محیط کشت صنعتی برای به‌دست آوردن حداکثر توده زیستی باکتری Bacillus subtilis UTB96 بود. در اولین گام به‌منظور کاهش هزینه‌های تهیه اجزای محیط کشت، ترکیبات تجاری یا پسماند صنایع مانند ملاس چغندرقند، ملاس نیشکر، فاضلاب سیب‌زمینی و سرم شیر به‌عنوان منابع کربن و شربت ذرت، به‌عنوان منبع ازت بررسی شدند. همچنین، بعضی از ترکیبات معدنی ازته مانند سولفات آمونیوم، اوره، کود گرانولة اوره و دی‌هیدروژن‌آمونیوم فسفات، به‌طور مقایسه‌ای ارزیابی شدند. در ادامه با مشخص‌شدن اجزای محیط کشت طراحی‌شده، این محیط در دو فرمانتور آزمایشگاهی و نیمه‌صنعتی، از نظر میزان تولید توده زیستی و نیز قدرت آنتاگونیستی مقایسه شد.نتایج به‌دست‌آمده در گام اول نشان داد که شربت خیسانده ذرت و ملاس نیشکر به‌ترتیب در غلظت‌های 2 و 10 گرم بر لیتر می‌توانند به‌عنوان منابع کربن و ازت صنعتی در تولید استفاده شوند. در نهایت، با قرار‌دادن محیط کشت طراحی‌شده در فرمانتور نیمه‌صنعتی میزان تولید تودة زیستی به اندازة 32/0 گرم بر لیتر به‌دست آمد. باکتری رشد‌یافته در این فرمانتور، می‌توانست رشد بیمارگرهای Aspergillus flavusو Phytophthora drechsleriرا در شرایط آزمایشگاهی به‌ترتیب به میزان 50 و 70 درصد کنترل کند؛ این در حالی است که میزان رشد باکتری UTB96 در فرمانتور آزمایشگاهی 31/0 گرم بر لیتر بود و باکتری رشد‌یافته در این شرایط می‌توانست رشد بیمارگرهایA. flavusو P. drechsleri را به‌ترتیب به میزان 78 و 54 درصد کنترل کند.
